TINCIÓN DIFERENCIAL.

Si se desean observar las caracteristicas, mofológicas de las bacterias, resulta sumamente util utilizar las preparaciones fijas y teñidas, debido a que estas permiten que las celulas se visualisen de mejor manera y se puedan diferenciar las distintas especies por su coloración, este método en particular se llama tinción diferencial o selectiva.
Los pasos a seguir para la tinción de las bacterias es hacer el frote, la fijación y la aplicación de las soluciones colorantes. La amplia gama de colorantes que se pueden utilizar, ha obligado a separarlos en tres grupos generales, los de trifelilmetano, los de oxacina y los de tiacina. Esta clasificacion es buena para la distincion de la familia de colorantes, pero en general se utiliza la clasificacion de acuerdo a su caracter ácido-base, es decir, ácidos, bases y neutros, debido a que estos depende mucho de sus comportamientos.
La coloración se da de acuerdo con la acción de los iones complejos de colorantes y los sitios activos de la superficie o del interior de la célula.
Entre los diversos tipo de coloración de bacterias, están la coloración simple, diferencial y la tinción negativa.

FUNDAMENTO
Se establece en la naturaleza y caracteristica de la pared celular bacteriana.

las gram positivas poseen una gruesa capa de peptodiglicano.
las gram negativas poseen una delgada capa prptodiglicano.
colorante basico que les da el gram positivo.

PASOS

1.Ya que se fijo (fijar la muestra con calentamiento suave).
2.Cubrir el preparado con dos gotas de cristal violeta durante 1 min.
3.Lavar cuidadosamente el preparado con agua destilada o agua corriente.
4.Cubrir el frotis con dos gotas de agua de oram durante 30 segundos.
5.Lavar cuidadosamente el frotis con agua.
6.Inclinar el porta objetos y aplicar gota a gota el decolorante dejando que se escurra hasta que no fluya la tintura.
7.inmediatamente lavar con agua.
8.Aplicar dos gotas de safranina.
9.Lavar el preparado con agua.
10.Secar suavemente el preparado con papel absorbente.